Аналитическая проба лрс. Фармакогностический анализ ЛРС: определение подлинности и доброкачественности

Лекарственное растительное сырье (ЛРС) и полученные из него продукты могут считать полноценным материалом только при условии соответствия нормам и требованиям. Для этого необходимо провести комплексный анализ сырья.

Анализ сырья может включать в себя товароведческий, фармакогностический, фитохимический, макро- и микроскопический и химический анализы. В сочетании все эти методы могут дать полное представление о качестве сырья и его пригодности для использования в лекарственных препаратах.

Товароведческий анализ лекарственного растительного сырья

Этот вид анализа ЛРС представляет собой наиболее полную разновидность анализа сырья, которая позволяет оценить качество и подлинность продукции в соответствии с требованиями НД. Анализ может проходить на перерабатывающих предприятиях, складах и в компаниях по производству лекарственных средств.

Анализ лекарственно-растительного сырья включает в себя три основных этапа:

• прием партии лекарственного растительного сырья;
• отбор в партии проб для проведения анализов;
• проведение исследования полученных образцов.

При исследовании могут быть определены:степень измельченности сырья, наличие в нем посторонних примесей, уровень содержание в нем действующих веществ, степень влажности, содержание примеси золы и так далее. Также во время товароведческого анализа может быть обнаружено наличие вредителей или следов их жизнедеятельности, гнили, плесени и других признаков порчи сырья.

Фармакогностический анализ лекарственного растительного сырья

Этот анализ, так же как и предыдущий, проводится для определения доброкачественности и подлинности продукции. Подлинность - это соответствие сырья тому наименованию, под которым оно продается. Фармакогностический анализ, в свою очередь, включает в фитохимическое, микроскопическое и макроскопическое исследования.

Фитохимический анализ лекарственного растительного сырья

Исследование с помощью фитохимического метода подразумевает определение качества лекарственного растительного сырья и исследования его количественных показателей. При этом определяется степень зольности, уровень влажности и другие ключевые показатели. Исследование проводится обычно с использованием физико-химических методов таких, как люминисцентного изучения, хроматографии, спектрофотометрии.

Макроскопический анализ лекарственного растительного сырья

Анализ ЛРС макроскопическим способом представляет собой изучение внешних признаков сырья без использования специального оборудования, в отличие от анализа микроскопического.

В ходе визуального анализа может быть использована лупа. При этом исследованию подвергаются морфологические признаки, цвет, запах, а в некоторых случаях и вкус продукции.

Нормы, которым должно соответствовать сырье, приведены в документах по государственной фармакопеи. Полученные в результате исследования данные сравниваются с теми характеристиками, которые можно увидеть в разделе «Внешние признаки» ГФ 4. Это одна из самых надежных методик для определения подлинности лекарственного сырья.

Микроскопический анализ лекарственного растительного сырья

Также при определении подлинности сырья может быть проведено его микроскопическое изучение.

Такой анализ может использоваться для исследования сырья в любом состоянии:

• в цельном;
• в порошковом;
• в резанном;
• в виде брикетов.

Особенно актуален он в тех случаях, когда необходимо сырье в измельченном виде.

При проведении анализа используется микроскоп, также могут быть задействованы гистохимическое или люминесцентное исследования.

Химический анализ лекарственного растительного сырья

Химический анализ позволяет определить не только подлинность, но и доброкачественность сырья. С помощью химических следований можно точно определить состав, количество действующего вещества и другие параметры, которые определяют качество продукции.

Биологически активные вещества могут быть извлечены из сырья при помощи:

• спирта;
• воды;
• органических растворителей.

В редких случаях для химического анализа могут быть использованы щелочи или кислоты.

В сочетании все перечисленные методы анализа позволяют точно определить, соответствует ли объект исследования своему наименованию, а также имеет ли оно необходимый уровень качества. При помощи отбора можно провести отбраковку продукции недостаточного качества и получить только лучшее сырье для производства лекарственных препаратов.

Трава череды обладает мочегонными и потогонными свойствами улучшает пищеварение нормализует нарушенный обмен веществ. Лекарственные свойства препаратов череды в определённой степени по-видимому обусловлены наличием аскорбиновой кислоты и марганца которые имеют важное значение в физиологических превращениях веществ. Масляные экстракты травы череды содержащие значительные количества нерастворимого в воде но...

Если эта работа Вам не подошла внизу страницы есть список похожих работ. Так же Вы можете воспользоваться кнопкой поиск

ВВЕДЕНИЕ……………………………………………………………………………………….

1.1 Краткая ботаническая характеристика семейства астровые (Asteraceae ) …………………

1.2 Ботаническая характеристика и распространение в растительном мире травы чередв трехраздельной … ……………………………………………………………………………..

1.3 Фармакологическое действие …………………………………………………………….

1.4 Химический состав ………………………………………………………………………..

1.5 Применение в медицине ………………………………………………………………….

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 1 ………………………………………………………………………

ГЛАВА 2 ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ЛРС В СООТВЕТСТВИИ С ФСП (ЭКСПЕРЕМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ) …………………………………………………………………………………..

2.1 Макроскопический анализ ………………………………………………

2.2 Микроскопический анализ……………………………………………….

2.3. Определение товароведческих показателей сырья……………………

2.3.1 Определение товароведческих показателей сбора……………………

2.3.2 Определение влажности………………………………………………….

2.3.3 Определение золы общей…………………………………………………

2.3.4 Определение золы, нерастворимой в 10% растворе кислоты хлористоводородной …………………………………………………………………

2.3.5 Качественное и гистохимическое определение основных групп биологически активных веществ…………………………………………………….

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 2 …………………………………………………….

ВВЕДЕНИЕ

Известно, что деятельность печени тогда будет нормальной, когда нормально функционируют: желудок, поджелудочная железа, кишечник, почки, сердце, легкие, селезенка, эндокринные железы и прочее. Все эти части организма человека очень тесно функционально связаны между собой и зависят одна от другой. Их деятельность, взятая вместе, составляет систему так называемого "обмена веществ". Если нарушается деятельность одного из этих органов, то нарушается общая, нормальная деятельность и всей системы обмена веществ.

Существует множество способов лечения, однако медикаментозное лечение далеко не всегда даёт желаемый результат.

В народе правильно подмечено, что почти все растения, употребляемые при лечении желудочно-кишечного тракта, лечат в соответствующей степени другие болезни, в том числе и заболевания печени и почек.

Механизм действия растительных препаратов заключается, в частности, в непосредственной стимуляции секреторной функции гепатоцитов (например, эфирные масла можжевельника, кориандра, душицы, тмина), повышении осмотического градиента между желчью и кровью и усилении поступления в желчные протоки воды и электролитов, стимуляции рецепторов слизистой оболочки тонкой кишки, что способствует активации аутокринной системы регуляции и усилению образования желчи.

При лечении печени и желчевыводящих путей применяются растения, содержащие горечи (иридоиды). Иридоиды (например, получаемые из одуванчика и тысячелистника) вызывают рефлекторное усиление выброса холецистокинина, а, следовательно, усиливают желчеотделение.

В механизм желчегонного действия последовательно включаются раздражение слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки, высвобождение холецистокинина, последний вызывает сокращение желчного пузыря и одновременно расслабляет сфинктер печеночно-поджелудочной ампулы . Спазмолитическое действие флавоноидов носит миотропный характер.

Растения мочегонного и желчегонного действия улучшают желчевыделительную функцию печени, усиливают выделительную функцию желчного пузыря и желчных протоков, улучшают работу почек. Весь этот комплекс в дополнении с жидкой формой лечебного препарата устраняет застой желчи в желчном пузыре. Таким образом, и при этом заболевании фитотерапия служит патогенетическим методом.

Несмотря на появление в арсенале современной медицине мощных препаратов, позволяющих бороться с причинами болезней печени и вмешиваться в ключевые звенья патогенеза, врачи продолжают обращаться к старым, «проверенным временем» рецептам. И в наше время в лечении гепатопатий достаточно широко применяются лекарственные препараты растительного происхождения.

Трава череды обладает мочегонными и потогонными свойствами, улучшает пищеварение, нормализует нарушенный обмен веществ . Лекарственные свойства препаратов череды в определённой степени, по-видимому, обусловлены наличием аскорбиновой кислоты и марганца , которые имеют важное значение в физиологических превращениях веществ. Ионы марганца в составе ферментных систем влияют на процессы кроветворения , свёртываемость крови , на деятельность желёз внутренней секреции .

Масляные экстракты травы череды, содержащие значительные количества нерастворимого в воде, но хорошо растворимого в жирах каротина , обладают противовоспалительными и ранозаживляющими свойствами. Дубильные вещества , до 66 % которых составляют полифенолы , придают растению ярко выраженные бактерицидные свойства.

Цель и задачи исследования

Целью настоящей работы является фармакогностическое изучение травы череды трехраздельной.

Для достижения поставленной цели необходимо решить следующие задачи:

Изучить морфолого-анатомические признаки травы череды трехраздельной;

Исследовать химический состав травы череды трехраздельной;

Определить товароведческие показатели сырья;

Определить содержание основных БАС.

Объект исследования : трава череды трехраздельной.

Методы исследования : морфолого-анатомические методы анализа, химические методы, определение товароведческих показателей.

Место проведения : Лаборатория фармакогнозии кафедры фармации ГБОУ ВПО СОГМА Минздрава России.

ГЛАВА 1 СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ ИЗУЧЕННОСТИ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ СЕМЕЙСТВА АСТРОВЫЕ (ASTERACEAE ) И ТРАВЫ ЧЕРЕДЫ (HERBA BIDENIS )

1.1 Краткая ботаническая характеристика семейства астровые –(Asteraceae )

Представители данного семейства — главным образом травянистые растения , однолетние или многолетние, реже кустарники или небольшие деревья . К исключениям можно отнести скалезию черешчатую (Scalesia pedunculata), высотой до 20 метров. Ещё выше вид брахилена мерана (Brachylaena merana ), до 40 метров высотой и 1 метра толщиной.

Главный отличительный признак этого семейства состоит в том, что у него, как показывает само название, цветы — сложные, то есть то, что в обиходе называется цветком, представляет на самом деле целое соцветие из мелких цветков — корзинку. Эти мелкие цветки сидят на общем ложе — расширенном конце цветоножки, имеющем плоскую, вогнутую или выпуклую поверхность и окружены общей обвёрткой, общей чашечкой, состоящей из одного или нескольких рядов прицветников (маленьких листочков, расположенных на цветоножке) — получается нечто наподобие корзиночки. Отдельные цветки обычно очень невелики, иногда совсем мелкие, длиной всего в 2—3 мм. Они состоят из нижней завязи, одногнёздой и односемянной, на верхушке которой прикреплён сростнолепестный венчик. У его основания обычно находится ряд волосков или щетинок, несколько зубчиков или перепончатая кайма.

Венчик сростнолепестный, по форме сильно различается, но выделяют два наиболее распространённых типа:трубчатый, с правильным пятизубчатым отгибом, и неправильный, так называемый язычковый , причём все пять его долей срастаются в одну пластинку, отогнутую в одну сторону. Другие три распространённых типа — двугубые , ложноязычковые и воронковидные цветки. Тычинок у всех астровых, за редкими исключениями, пять; они прирастают своими нитями к трубке венчика, а пыльниками срастаются в одну полую трубку, окружающую столбик, который кончается двураздельным рыльцем различного устройства. Гинецей псевдомонокарпный, сросшийся из двух плодолистиков, образующих нижнюю одногнёздную завязь с единственным семязачатком.

У очень многих растений описываемого семейства головки состоят только из трубчатых цветочков, как, например, у васильков , лопуха , волчеца , артишока . У других же, как одуванчика , козельца (скорцонеры ), латука , цикория и других все цветы язычковые. Наконец, у третьих в каждой головке находятся цветы обоих типов: по окружности язычковые, а в центре трубчатые (например, у подсолнечника , астры , георгина , ноготков , бархатцев , ромашки ).

Можно упомянуть ещё про третий тип венчика — двугубый, в котором три доли венчика направлены в одну сторону, а две остальные в другую.

Размер соцветия, как правило, небольшой, до нескольких сантиметров в диаметре; и только у некоторых видов он достигает в диаметре 10—15 см, а у культивируемого подсолнечника, имеющего самое крупное соцветие в семействе, может достигать до 60 см. В то же время у некоторых видов полыни высота и ширина соцветия не превышает 2—4 мм.

Листья у сложноцветных, как правило, очерёдные, редко супротивные. Их величина, форма, а также степень расчленения сильно различается у разных видов Большинство видов имеет хорошо развитый стержневой корень. Часто корень клубневидно утолщён как, например, у лопухов (Arctium). У многих видов семейства развиваются контрактильные (то есть втягивающие) корни; у растений с прикорневой розеткой они часто обеспечивают плотное прилегание розеток к земле

Плод сложноцветных — семянка , то есть одногнёздный односемянной, нерастрескивающийся орешек с кожистой или деревянистой оболочкой. При этом те волоски или щетинки, которые окружали основание венчика, превращаются в хохолок, и позволяющий семянкам далеко разноситься по ветру). У других же видов на конце семянки развиваются два или три шипика с обращёнными назад зубцами (как у череды ). Посредством этих шипиков семянки прицепляются к шерсти животных или одежде человека и таким образом разносятся на далёкое расстояние (зоохория ). Сравнительно у немногих видов сложноцветных нет никаких особых приспособлений для разноса плодов. Семена сложноцветных всегда без белка , с очень маслянистыми семядолями .

1. Ботаническая характеристика и распространение в растительном мире травы череды трехраздельной

Череда Трехраздельная (Bidenis Tripaitita ), семейства Астровые (Asteraceae ) - однолетнее растение с прямостоячим, цилиндрическим, супротивно ветвистым стеблем высотой 30—100 см. Листья супротивные, срастающиеся своими основаниями, глубокотрехраздельные, только верхние простые (рис.1).

Рисунок 1 – Череда трехраздельная

Цветки желтые, в плоских крупных корзинках, сидящих одиночно на концах стебля и ветвей. Каждая корзинка окружена двойной обверткой, наружные листочки которой длиннее корзинки — зеленые листовидные, внутренние листочки значительно короче наружных, пленчатые красноватые. Цветки все трубчатые. Над нижней завязью имеются 2—3 прямостоящие острозубчатые щетинки. Цветет с августа до сентября (рис.2).

Рисунок 2 – Цветки череды трехраздельной

Череда встречается как растение низинных болот и заболоченных лугов или как сорное по сырым канавам, около водоемов, часто вместе с водяным перцем.

Распространена почти во всей России, кроме Крайнего Севера.
Сырье должно представлять отдельные листья и облиственные верхушки растений без цветов, с цветами или бутонами, но без плодов. Отдельные листья глубокотрехраздельные с пиловидно-зазубренными краями. На верхушках листья расположены супротивными парами и срастаются основаниями коротких черешков. Цветки мелкие, в корзинках, окруженных двойной обверткой наружные листочки которой длинней корзинки.
Размер: длина листьев до 10—15 см. длина облиственных верхушек около 15 см, поперечник цветочной корзинки около 1 см. Цвет листьев и стеблей — темнозеле-ный, цветков — желтый, запах — слабый, своеобразный, вкус — вяжущий. Упаковывают череду в тюки по 100 кг.

1.3 Отличительные признаки череды трехраздельной и сходных видов

Рисунок 3 - Виды череды:

А – череда трехраздельная; Б – череда поникшая.

Лекарственным сырьем являются верхушки стеблей и боковых ветвей череды длиной не более 15 см и все листья (НегЬа Bidentis), собранные в период бутонизации в первой половине июня. Сырье, заготовленное в период цветения, после сушки становится непригодным, так как при сушке в естественных условиях цветение продолжается и корзинки становятся колючими. В таких случаях срезают только боковые веточки без потемневших плодоносящих корзинок. Сушку проводят в сушилках при температуре 40-45 °С или в тени под навесами, на чердаках с хорошей вентиляцией, раскладывая слоем 5-7 см. В начале сушки сырье ежедневно переворачивают. Когда стебли начинают ломаться, сушку сырья прекращают. Срок годности сырья 2 года. Запах сырья специфический, при растирании усиливающийся. Вкус терпкий, с едким привкусом

1.4 Фармакологические свойства травы череды трехраздельной

Настойка череды, обладает седативными свойствами, понижает АД, одновременно несколько увеличивает амплитуду сердечных сокращений. В экспериментах обнаружены антиаллергические свойства препаратов череды, которые объясняют высоким содержанием в расятении аскорбиновой кислоты, стимулирующей функцию надпочечников и оказывающей разностороннее влияние на обменные процессы в организме. Антиаллергическое действие проявляется ослаблением симптомов экспериментального анафилактического шока и задержкой развития феномена Артюса.

При удалении гипофиза у экспериментальных животных антиаллергического действия череды не отмечено. Комбинация флавоноидов и полисахаридов череды поникшей в эксперименте превосходит фламин по стимулирующему действию на холатосинтезирующую функцию, увеличивает содержание конъюгированных желчных кислот и показатель холатохолестеринового коэффициента желчи.

Флавоноидам присущи гепатозащитные свойства, которые включают холеретическое, холатостимулирующее, противовоспалительное и капилляроукрепляющие компоненты. Сочетание в череде флавоноидов и водорастворимых полисахаридов способствует улучшению всасываемости растительного комплекса череды и повышению его активности. В эксперименте флавоноиды череды трехраздельной устраняла действие гепатотропных ядов, восстанавливала секрецию желчи и уровень холатов до контрольных цифр. На обмен веществ влияют и ионы марганца, найденные в растении. Они входят в состав различных ферментных систем, влияют на процессы кроветворения, функцию печеночной клетки, тонус стенок сосудов, желчных ходов, способны предупреждать образование внутрисосудистых тромбов.

Эфирные экстракты из череды в эксперименте оказывают противомикробное действие в отношении грамположительных бактерий и некоторых патогенных грибов. Флавоноидные соединения череды (флавоны и халконы) обладают бактериостатическим и инсектицидным свойством. Противомикробные и противовоспалительные свойства препаратов череды связаны также с дубильными веществами, в составе которых преобладают простейшие по строению полифенолы, обладающие более выраженными противомикробными свойствами, чем дубильные вещества типа танинов.

Выраженные противомикробные свойства череды связаны, кроме того, с большим содержанием марганца в ее препаратах.

Препараты череды при местном применении улучшают трофику тканей; при термическом ожоге спиртовые экстракты череды оказывают противовоспалительное и защитное действие.

1.4 Химический состав череды трехраздельной

Лечебные свойства череды определяют богатый набор полезных веществ. в череде трехраздельной содержатся дубильные вещества (до 4,46%) конденсированного ряда горечи, слизи, флавоноиды, кумарины (умбеллиферон и скополетин), g–лактоны, амины, эфирное масло и аскорбиновая кислота (60–70мг%).

1.5 Применение в медицине

Череда относится к древнейшим народным лекарственным средствам. Внутрь череду принимают как мочегонное, потогонное и жаропонижающее средство в виде настоев и "чаев".

При заболеваниях почек и мочевыводящих путей рекомендуется следующий лекарственный сбор: череды 2 части, толокнянки 3 части, березовых почек 1 часть. Из сбора готовят отвар.

Череду применяют при атапоческом дермтите, псориазе, микробной экземе, эпидермофитии, гнездном облысении. При псориазе череду принимают внутрь в виде настоя (20,0:200,0). Принимают настой по 1/4 стакана 2-3 раза в день.

При крапивнице применяют лекарственный сбор, в который входят трава череды, листья крапивы, трава (или цветки) тысячелистника, листья черной смородины, корни лопуха и листья земляники. Для приготовления настоя берут по 1 столовой ложке каждого растения и заливают 1 л холодной воды, кипятят на слабом огне 10 мин, процеживают и принимают по 2 столовые ложки каждый час до исчезновения высыпаний.

Смесь череды, листьев крапивы, цветков тысячелистника, листьев черной смородины по 10 г, травы трехцветной фиалки (20 г), корня лопуха (15 г) и листьев земляники (15 г) используют при кожных заболеваниях в виде отвара (1 столовая ложка сбора на 200 мл воды).

При кожных заболеваниях (диатез) и рахите череду применяют также в виде настоя (из 10-30 г травы) для ванны. Настой выливают в ванну и добавляют 100 г поваренной или морской соли. Температура воды в ванне 37-38°С. При мокнущих экземах и диатезах назначают общие и местные ванны с травой череды, дубовой корой и цветками ромашки. Берут по 1 столовой ложке каждого растения, настаивают в 1 л холодной воды 10-12 ч. Затем доводят до кипения, процеживают и выливают настой в ванну (для детской ванны 10 л воды, температура 37-38°С). При купании больного с экссудативным диатезом и кожными высыпаниями концентрацию череды можно увеличить в 2-3 раза.

При всех видах локальных зудящих дерматозов используют местные ванны (например, для конечностей; сидячие ванны при зуде промежности у больных сахарным диабетом, при геморрое). При зуде в области спины, шеи, подмышечной и паховой областях можно рекомендовать аппликации распаренной травы череды или компрессы с крепкими настоями. При нейродермитах, сопровождающихся выраженным зудом, настой череды применяют в виде аппликаций с местноанестезирующими веществами (новокаин, анестезин). При мокнущих диатезах у детей смачивают ткань отваром череды и накладывают на кожу, меняя примочки 5-6 раз в день. При явлениях воспаления примочки применяют холодными.

Наружно череду применяют также при лечении гнойных ран, трофических язв с признаками воспаления. Череда подсушивает раневую поверхность и способствует более быстрому заживлению пораженных участков кожи. Череда используется для приготовления ванночек, примочек и обтираний при микробной экземе стоп, эпидермофитии (лучшие результаты получены при лечении интертригинозной формы эпидермофитии).

Череду применяют как косметическое средство при угрях, себорее. Отваром череды умываются, делают косметические маски. Трава череды поступает в аптеки в пакетах по 100 г или в специальных брикетах.

Настой травы череды (Infusum herbae Bidentis): 10 г травы помещают в эмалированную посуду, заливают 200 мл воды комнатной температуры, накрывают крышкой, нагревают на кипящей водяной бане при частом помешивании в течение 15 мин, охлаждают при комнатной температуре 45 мин, процеживают, добавляют воды до 200 мл. Принимают по 1 столовой ложке 2-3 раза в день

Череда может вызвать нервную возбудимость, приступы раздражительности и панических атак. Кроме того, значительное превышение дозы приводит к нарушению стула, падению артериального давления, угнетению состояния. Детям череду не рекомендуется употреблять до трех лет, а беременным женщинам воздержаться в период второго и третьего триместров

Трава череды, брикеты, настои. Череда входит в состав Аверина чая и в состав по прописи Здренко.

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 1

1.Изучена ботаническая характеристика семейства астровых и череды трехраздельной.

2. Согласно литературным данным, в состав череды трехраздельной входит горькое и дубильное вещество, эфирное масло, слизь, амины, флавоноиды, аскорбиновая кислота, каротиноиды, витамины и пр. Кроме того, трава череды трехраздельной богата такими макроэлементами, как кальций, магний, калий, и микроэлементами, среди которых алюминий, железо, бор, ванадий, медь, никель, хром, марганец, селен, цинк., что обуславливает ее широкое прирменение в медицине.

3 . Снятие воспалений, выведение желчи – это те свойства, которыми обладает череда трехраздельная. Применение настоя и настойки из нее подходит для лечения рахита, анемии, артрита, атеросклероза, заболеваний верхних дыхательных путей, диатеза и подагры. Трава растения является одним из основных компонентов в популярном сборе Здренко. Внутренне отвары, настои, настойки из череды нужно употреблять при простудных заболеваниях, головных болях, нарушении обмена веществ, радикулите, сахарном диабете или проблемах с печенью или мочевым пузырем. Трава растения является прекрасным средством для детских ванн, она дает возможность снять симптоматику диатеза, сопровождаемого угревой сыпью, кроме того, излечить можно и себорею. Настои и отвары из череды народная медицина ценит за ее мочегонное свойство, возможность остановить воспаления в мочевом пузыре, а также вылечить бронхит, золотуху, селезеночные заболевания. Растение наружно применяют для лечения гнойных заболеваний кожи, прыщей и фурункулов.

ГЛАВА 2 ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ЛРС В СООТВЕТСТВИИ С ФСП (ЭКСПЕРЕМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ)

2.1 Макроскопическое исследование

Череда трехраздельная фирмы производителя «Фитофарм» представляет собой кусочки листьев, стеблей, бутонов и цветков. Цвет зеленый, коричневато – зеленый, или зеленовато – фиолетовый с грязновато – желтыми вкраплениями. Запах слабый. Вкус водного извлечения горьковатый, слегка вяжущий (рис.1).

А

Б

Рисунок 1 А,Б – трава череды трехраздельной

2.2 Микроскопическое исследование

Микроскопическое изучение -это метод изучения объектов невидимых невооруженным глазом, путем рассматривания их изображений, увеличенных с помощью микроскопов.

Изучение внешних признаков травы мяты длиннолистной проводили визуальным наблюдением невооруженным глазом, а также с помощью лупы (х10), в соответствии с ОФС «Методы анализа лекарственного растительного сырья» ГФ XI . Изучение анатомического строения стеблей, листьев и цветков мяты длиннолистной проводили на свежем и высушенном материале, предварительно размоченном спирто-водно-глицериновой смесью. Просветляли препараты кипячением в 3%-ном растворе натрия гидроксида и хлоралгидрате.

Анатомические исследования проводили при помощи микроскопа «Биолам-С» с увеличением объективов х4; x 10; х40, микропрепараты фотографировали цифровым фотоаппаратом « SONY CS 5,1». Фотографии обрабатывали на компьютере с помошью программы Abode Photoshop 7,0.

Полученные срезы окрашивали следующими реактивами: спиртовой раствор флороглюцина и 50%-й раствор кислоты серной. В ходе эксперимента использовали временные микропрепараты, которые фиксировали в растворе хлоралгидрата или глицерина. Результаты микроскопического исследования травы череды трехраздельной представлены на рисунке 2.

Рисунок 3 - Микроскопия листа череды трехраздельной:

А – эпидермис верхней стороны листа; Б – эпидермис нижней стороны листа;

В – край листа: 1 - тонкостенные волоски; 2 – толстостенные волоски; 3 – секреторные ходы.

При рассмотрении травы с поверхности виден эпидермис верхней и нижней стороны с извилистыми. Устьица многочисленные, окружены 3-5 клетками эпидермиса (аномоцитный тип). По всей пластинке листа встречаются простые гусеницеобразные волоски с тонкими стенками, состоящие из 9-18 клеток, иногда заполненных бурым содержимым; на нижней клетке волоска хорошо выражена продольная складчатость кутикулы. По краю листа и жилкам встречаются простые волоски с толстыми стенками и продольной складчатостью кутикулы, состоящие из 2-13 клеток. У основания таких волосков лежат несколько клеток эпидермиса, слегка приподнимающихся над поверхностью листа. Вдоль жилок проходят секреторные ходы с красновато-бурым содержимым, особенно хорошо заметные по краю листа.

2.3 Определение числовых показателей

Измельченное сырье. Полисахаридов не менее 3,5%; влажность не более 13%; золы общей не более 14%; пожелтевших, побуревших и почерневших частиц не более 8%; кусочков стеблей не более 40%; частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 7 мм, не более 10%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 0,5 мм, не более 15%; органической примеси не более 3%; минеральной примеси не более 1%.

2.3.1 Определение товароведческих показателей сырья

Доброкачественность сырья определяли по следующим товароведческим показателям: определение влажности, золы общей, золы, нерастворимой в кислоте хлористоводородной 10%, содержание экстрактивных веществ, извлекаемых водой и спиртом этиловым различной концентрации, содержание органических и минеральных примесей, пожелтевших и побуревших частей растения.

3. Определение товароведческих показателей сбора

3.1 Определение влажности

Аналитическую пробу сырья измельчали до размера частиц около 10 мм, перемешивали и брали две навески массой 3 - 5 г, взвешенные с погрешностью 0,01 г. Каждую навеску помещали в предварительно высушенную и взвешенную вместе с крышкой бюксу и ставили в нагретый до 100 - 105°С сушильный шкаф. Время высушивания отсчитывали с того момента, когда температура в сушильном шкафу вновь достигла 100 - 105°С. Первое взвешивание проводили через 2 ч.

Высушивание проводили до постоянной массы. Постоянная масса считается достигнутой, если разница между двумя следующими взвешиваниями после 30 мин высушивания и 30 мин охлаждения в эксикаторе не превышает 0,01 г. .

Влажность сырья (Х) в процентах вычисляют по формуле:

(1)

где m - масса сырья до высушивания в граммах;

m 1 -масса сырья после высушивания в граммах.

Среднее значение влажности по результатам определений составило 8,67 ± 0,17 %.

3.2 Определение золы общей

Около 3-5 г сбора (точная навеска) помещают в предварительно прокаленный и точно взвешенный фарфоровый тигель, равномерно распределяя вещество по дну тигля. Затем тигель осторожно нагревают, давая сначала сырью сгореть при возможно более низкой температуре. После того как уголь сгорел почти полностью, увеличивают нагрев. При неполном сгорании частиц угля остаток охлаждают, смачивают водой или насыщенным раствором аммония нитрата, выпаривают на водяной бане и остаток прокаливают. В случае необходимости такую операцию повторяют несколько раз. Прокаливание ведут при слабом красном калении (около 500 °С) до постоянной массы, избегая сплавления золы и спекания её со стенками тигля .

m – масса золы, г;

а -масса ЛРС, г;

W – влажность ЛРС, %.

Среднее значение золы по результатам определений составило 13,14 ± 0,58 % ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 2

3.3.3 Определение золы, нерастворимой в 10% растворе кислоты хлористоводородной

К остатку в тигле, полученному после сжигания сбора, прибавляли 15 мл 10% раствора хлористоводородной кислоты, тигель накрывали часовым стеклом и нагревали 10 мин на кипящей водяной бане. К содержимому тигля прибавляли 5 мл горячей воды, обмывая ею часовое стекло. Жидкость фильтровали через беззольный фильтр, перенося на него остаток с помощью горячей воды. Фильтр с остатком промывали горячей водой до отрицательной реакции на хлориды в промывной воде, перенося его в тот же тигель, высушивали, сжигали, прокаливали и взвешивали .

m – масса золы, г;

а - масса ЛРС, г;

W – влажность ЛРС, %.

Среднее значение по результатам определений составило 1,38±0,06%.

3.4 Качественное и гистохимическое определение основных групп биологически активных веществ

1. Наличие эфирного масла в листьях мелиссы лекарственной доказывали с реактивом Судан III , наблюдая под микроскопом окрашивание эфирномасличных желёзок в оранжево-красный цвет.

2. К 5 мл водного извлечения, полученного из сбора (1:10) прибавляли 15 мл 95% спирта и перемешивали - появлялись хлопьевидные сгустки, выпадающие в осадок при стоянии (полисахариды).

3. К 2 мл водного извлечения, полученного из сбора (1:10) добавляли 4-5 капель раствора железоаммониевых квасцов, появляется черно-зеленое окрашивание (дубильные вещества).

4. К 1 мл спирто-водного извлечения, полученного из сбора (1:10) прибавляли 2 мл 2% раствора алюминия хлорида в 95% спирте и 7 мл 95% спирта - раствор окрашивался в зеленовато – желтый цвет (флавоноиды)

5. Раствор с осадком фильтруют через стеклянный фильтр ПОР 16, осадок с фильтра переносят в пробирку, прибавляют 5 мл разведенной хлористоводородной кислоты, кипятят несколько минут, прибавляют 10 мл реактива Фелинга и снова кипятят; появляется оранжево-красный осадок (восстанавливающие сахара)

6. Раствор желатина - к 2-3 мл испытуемого раствора добавляют по каплям раствор желатина, появляется муть (рис.4).

Рисунок 4 – Реакция с раствором желатина

7. Лактонная проба. Реакция проводится с контрольным опытом. Извлечение, содержащее кумарины, наливают в две пробирки. В одну из них добавляют несколько капель 10 % раствора натрия гидроксида. Обе пробирки нагревают на водяной бане, затем в обе прибавляют по 5 мл дистиллированной воды и хорошо перемешивают.

Рисунок 5 – Лактонная проба

Если в пробирке, куда добавляли щелочь, раствор остался желтым и прозрачным, значит, реакция положительная, так как образуется желтая растворимая в воде соль кислоты кумаровой. В контрольной пробирке при добавлении воды раствор мутнеет, кумарины не растворяются в воде и выпадают в осадок. При подкислении щелочного раствора лактонное кольцо замыкается, и кумарины выпадают в осадок (рис.5).

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 2

1. Выявлены основные морфолого-анатомические признаки травы череды трехраздельной.
2. Определены товароведческие показатели сырья: влажность составила 8,67%, зола общая – 13,14%, зола нерастворимой в 10% растворе кислоты хлористоводородной 1,38±0,06%.
3. Проведено качественное и гистохимическое определение основных групп биологически активных веществ (эфирного масла, флавоноидов,

Результаты исследования свидетельствуют о соответствии сырья требованиям ГФ ХI и ФСП по показателям «ПОДЛИННОСТЬ», «ДОБРОКАЧЕСТВЕННОСТЬ» , «УПАКОВКА» , «МАРКИРОВКА» .

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Атлас лекарственных растений России /Д. Н. Анели и др. - М.: [ВИЛАР], 2006. - 345 с.4

2. Гаммерман, А. Ф., Гром, И.И. Дикорастущие лекарственные растения СССР. - М.: Медицина, 1976. - 288 с.15

3. Гизатулин, А.Н., Гизатулина, Ф.Т. Лекарственные растения в научной и народной медицине. - Троицк, 1999. - С. 117-119.18

4. Гончарова, Т.А. Энциклопедия лекарственных растений: (лечение травами): В 2-х тт. Т.1 - М: Изд. Дом МСП, 1997. - с. 168.19

5. Ловкова, М.Я., Рабинович, A . M ., Пономарева, С.М., Бузук Г.Н., Соколова С.М. Почему растения лечат. // М.: Наука, 1989. С. 186 - 187.52

6. Мазнев, Н.И. Лекарственные растения: 15000 наименований лекарственных растений, сборов и рецептов. Описания, свойства, применение, противопоказания. - М.: ООО ИКТЦ «ЛАДА», ООО ИД «РИПОЛ классик», ООО Издательство «Дом XXI век», 2006. - 1056 е., ил. с.649 - 653.53

7. Муравьева, Д.А., Самылина, H.A., Яковлев, Г.П. Фармакогнозия: Учебник. - 4-е изд. перераб. и доп. - М.: Медицина, 2002. - 656 с.79.64

Лекарственное сырье и полученные из него продукты представляют собой полноценный материал в том случае, если они по всем параметрам соответствуют действующим нормативному документу. Это соответствие определяется путем проведения фармакогностического анализа.

Под фармакогностическим анализом понимают комплекс методов анализа сырья растительного и животного происхождения, позволяющих определить его подлинность и доброкачественность.

Подлинность - это соответствие исследуемого объекта наименованию, под которым он поступил на анализ.

Доброкачественность - соответствие лекарственного сырья требованиям нормативного документа.

Фармакогностический анализ складывается из ряда последовательно проводимых анализов: макроскопического, микроскопического, фитохимического и товароведческого. В некоторых случаях он дополняется определением биологической активности сырья.

Подлинность сырья, как правило, устанавливается путем макроскопического и микроскопического анализов, реже используются элементы фитохимического анализа путем проведения качественных реакций на наличие в сырье тех или иных групп соединений. Доброкачественность определяется на основе данных товароведческого и фитохимического анализов и, если необходимо, путем установления биологической активности сырья.

Товароведческий анализ включает правила приемки сырья, регламентирует отбор проб для проведения последующих испытаний сырья на содержание примесей, степень измельченности, зараженность амбарными вредителями, содержание влаги, золы, действующих веществ и т. д.

Определение степени зараженности растительного сырья амбарными вредителями

Исследование на наличие амбарных вредителей проводят в обязательном порядке при приемке лекарственного растительного сырья, а также ежегодно при хранении. Метод определения степени зараженности сырья амбарными вредителями изложен в ГФ XI (вып. 1, с. 276). Проба для установления степени зараженности вредителями выделяется методом квартования из объединенной пробы массой 500 г для мелких видов сырья и массой 1000 г для крупных видов сырья (ОФС 42-0013-03).

При анализе определяют степень зараженности по наличию клещей и насекомых в пересчете на 1 кг сырья.

Пробу просеивают сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. В сырье, прошедшем сквозь сито, проверяют наличие клещей (с помощью лупы), в сырье, оставшемся на сите, - моли, точильщика, долгоносика и их личинок, живых и мертвых насекомых.

Различают три степени зараженности вредителями: I степень - в 1 кг сырья не более 20 клещей или не более 5 насекомых; II степень - более 20 клещей, свободно передвигающихся по поверхности сырья и не образующих сплошных масс, или 6-10 экземпляров моли, точильщика и их личинок и др.; III степень - клещи образуют сплошные войлочные массы, движение их затруднено, или более 10 экземпляров насекомых в сырье (моль, точильщик, их личинки и др.).

Сырье, зараженное вредителями, после дезинсекции просеивают сквозь сито с отверстиями 0,5 мм (при зараженности клещами) или 3 мм (при зараженности другими вредителями).

После обработки сырье при I степени зараженности вредителями может быть допущено к медицинскому применению. При II степени и в исключительных случаях при III степени зараженности сырье может быть использовано для переработки с целью получения индивидуальных веществ, в остальных случаях сырье уничтожают.

Определение измельченности

При определении измельченности аналитическую пробу помещают на сито, указанное в соответствующем нормативном документе на данный вид лекарственного сырья, и осторожно, плавными вращательными движениями просеивают, не допуская дополнительного измельчения. Просеивание измельченных частей считается законченным, если количество сырья, прошедшего сквозь сито при дополнительном просеве в течение 1 минуты, составляет менее 1 % сырья, остающегося на сите.

Для цельного сырья частицы, прошедшие сквозь сито, взвешивают и вычисляют их процентное содержание к массе аналитической пробы.

Для просеивания резаного, измельченного, дробленого, порошкованного сырья берут два сита. Пробу сырья помещают на верхнее сито и просеивают. Затем отдельно взвешивают сырье, оставшееся на верхнем сите и прошедшее сквозь нижнее сито, и вычисляют процентное содержание частиц, не прошедших сквозь верхнее сито, и содержание частиц, прошедших сквозь нижнее сито, к массе аналитической пробы. Взвешивание проводят с погрешностью ±0,1 г при массе аналитической пробы свыше 100 г и ±0,05 г при массе аналитической пробы 100 г и менее.

Допустимая норма содержания измельченных частиц для каждого вида сырья указана в соответствующем нормативном документе.

Определение содержания примесей

Оставшуюся часть аналитической пробы после отсева измельченных частиц (для цельного сырья) или сход с верхнего сита (для измельченного, дробленого сырья) помещают на чистую, гладкую поверхность и лопаточкой или пинцетом выделяют примеси, указанные в нормативном документе на лекарственное растительное сырье. Обычно к примесям относят:

■ части сырья, утратившие окраску, присущую данному виду (побуревшие, почерневшие, выцветшие и т. д.);

■ другие части этого растения, не соответствующие описанию сырья;

■ органическую примесь (части других неядовитых растений);

■ минеральную примесь (земля, песок, камешки). Одновременно обращают внимание на наличие амбарных вредителей.

Каждый вид примеси взвешивают отдельно с той же погрешностью, как и при определении измельченности.

Определение влажности лекарственного растительного сырья

Воздушно-сухое сырье обычно содержит 10-14 % гигроскопической воды. Повышенное содержание влаги в сырье приводит к его порче: изменяется окраска сырья, появляются затхлый запах, плесень, разрушаются действующие вещества. Такое сырье использовать нельзя. Поэтому нормативный документ для каждого вида сырья устанавливает норму содержания влаги (влажность) не выше определенного значения.

Под влажностью сырья в товароведческом анализе понимают не только потерю в массе при высушивании за счет гигроскопической воды, но фактически и различных летучих веществ.

Известны различные способы определения влажности. В ГФ XI (вып. 1, с. 285) для определения влажности в лекарственном растительном сырье принят метод высушивания до постоянной массы при температуре 100-105 °С.

Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц около 10 мм, перемешивают и берут две навески массой 3-5 г, взвешенные с погрешностью ±0,01 г. Каждую навеску помещают в предварительно высушенную и взвешенную вместе с крышкой бюксу и ставят в нагретый до температуры 100-105 °С сушильный шкаф (крышка бюксы должна быть открыта). Первое взвешивание листьев, трав и цветков проводят через 2 часа, корней, корневищ, коры, плодов, семян и других видов сырья - через 3 часа.

Высушивание проводят до постоянной массы. Постоянная масса считается достигнутой, если разница между двумя последующими взвешиваниями после 30 минут высушивания и 30 минут охлаждения в эксикаторе не превышает 0,01 г

Определение потери в массе при высушивании для пересчета количества действующих веществ и золы на абсолютно сухое сырье («абсолютная влажность») проводят в навесках 1-2 г (точная навеска), взятых из аналитической пробы, предназначенной для определения золы и действующих веществ, вышеописанным методом, но при разнице между взвешиваниями, не превышающей 0,0005 г.

Определение содержания золы

Лекарственное растительное сырье содержит не только органические, но и минеральные вещества. Кроме того, сырье, особенно подземные части растений, бывает загрязнено посторонними минеральными примесями: кусочками земли, камешками, песком, пылью на густоопушенных листьях и др. Нормирование их уровня является условием получения качественного сырья. С этой целью почти для всех видов сырья определяется содержание общей золы, а для сырья, используемого для приготовления настоев и отваров, - и содержание золы, нерастворимой в 10 % растворе хлористоводородной кислоты.

Общая зола - это остаток несгораемых неорганических веществ, оставшийся после сжигания и прокаливания сырья. Этот остаток состоит из минеральных веществ, свойственных растению, и посторонних минеральных примесей (земля, песок, камешки, пыль).

Зола, нерастворимая в 10 % растворе хлористоводородной кислоты, состоит в основном из оксида кремния и характеризует загрязненность сырья посторонними минеральными примесями.

Определение общей золы

Около 3-5 г измельченного лекарственного растительного сырья (точная навеска) помещают в предварительно прокаленный и точно взвешенный фарфоровый, кварцевый или платиновый тигель, равномерно распределяя сырье по дну тигля. Затем тигель осторожно нагревают, давая сначала сырью сгореть. При неполном сгорании частиц угля остаток охлаждают, смачивают водой или насыщенным раствором аммония нитрата, выпаривают на водяной бане и остаток прокаливают. В случае необходимости такую операцию повторяют несколько раз.

Прокаливание ведут при слабом красном калении (около 500 °С) до постоянной массы, избегая сплавления золы и спекания ее со стенками тигля. По окончании прокаливания тигель охлаждают в эксикаторе и взвешивают.

Определение золы, нерастворимой в 10 % растворе хлористоводородной кислоты

К остатку в тигле, полученному после сжигания препарата или лекарственного растительного сырья, прибавляют 15 мл 10 % раствора хлористоводородной кислоты, тигель накрывают часовым стеклом и нагревают 10 минут на кипящей водяной бане. К содержимому тигля прибавляют 5 мл горячей воды, обмывая ею часовое стекло. Жидкость фильтруют через беззольный фильтр, перенося на него остаток

с помощью горячей воды. Фильтр с остатком промывают горячей водой до отрицательной реакции на хлориды в промывной воде, переносят его в тот же тигель, высушивают, сжигают, прокаливают, как указано выше, и взвешивают.

Постоянная масса считается достигнутой, если разница между двумя последующими взвешиваниями после 30 минут высушивания и 30 минут охлаждения в эксикаторе не превышает 0,0005 г.

Макроскопический анализ состоит в определении морфологических (внешних) признаков испытуемого сырья визуально - невооруженным глазом или с помощью лупы (10х), а также в определении размеров, цвета, запаха сырья и вкуса (для неядовитых объектов!). Общие правила макроскопического анализа для установления подлинности приведены в общих фармакопейных статьях ГФ XI.

Микроскопический анализ лекарственного растительного сырья является одним из методов определения его подлинности. Особое значение этот метод приобретает в случаях анализа резаного или порошкованного сырья, определить подлинность которого по макроскопическим признакам трудно. Определение подлинности основывается на особенностях анатомического строения, характерных для той или иной морфологической группы.

Листья. Для проведения микроскопического анализа листьев чаще всего используют препарат листа с поверхности. Для этого части листьев (или небольшие цельные листья) кипятят в 5 % растворе натрия гидроксида (в случае неприемлемости по ряду причин использования раствора щелочи кипятят в воде), промывают для освобождения от щелочного раствора и помещают на предметное стекло верхней и нижней стороной. Приготовленный препарат листа должен содержать край листовой пластинки, а также район центральной жилки. После этого препарат заключают в каплю глицерина или хлоралгидрата, помещают под покровное стекло и рассматривают под микроскопом при увеличении в 80-120 и 400-600 раз.

При анализе препарата листа с поверхности диагностическими признаками являются размеры и форма клеток эпидермиса, характер клеточных стенок, тип устьичного аппарата, наличие и строение простых волосков (трихом), железистых волосков, железок. В мезофилле диагностическое значение имеют различные типы кристаллических включений и включений запасающих веществ, различные типы эндогенных структур выделительной ткани, иногда - наличие кристаллоносной обкладки вокруг жилок.

Трава. Для микроскопического анализа травы используют препараты листа и эпидермиса стебля с поверхности, а также поперечный срез стебля. Поперечный срез стебля делают после предварительного кипячения стебля в растворе натрия гидроксида. Для обнаружения локализации одревесневших элементов применяют микрохимическую реакцию с раствором флороглюцина в концентрированной хлористоводородной кислоте.

Диагностическими признаками на поперечном срезе стебля являются тип строения стебля (пучковое или непучковое), тип и локализация пучков. Важное значение имеют также наличие и характер механических элементов в коровой части стебля, кристаллические включения и включения запасных питательных веществ, а также различные эндогенные выделительные структуры и специфические структуры, накапливающие биологически активные вещества. Для их обнаружения используют различные микрохимические реакции (на присутствие эфирных масел, крахмала, слизей, дубильных веществ, алкалоидов и др.).

Подземные органы. Для микроскопического анализа подземных органов (корневищ, корней, клубнелуковиц и т. д.) используют поперечные и продольно-тангентальные срезы, давленые препараты и препараты порошков. Для проведения анализа подземные органы предварительно выдерживают в спирто-глицериновой смеси для размягчения. Для определения локализации механических элементов проводят реакцию с раствором флороглюцина в концентрированной хлористоводородной кислоте.

На микропрепарате определяют тип подземного органа (корень или корневище) по анатомическому строению. Диагностическое значение имеют характер расположения одревесневших элементов, строение пробки, особенности коровой паренхимы, кристаллические включения и включения запасных питательных веществ, эндогенные выделительные структуры и структуры, накапливающие биологически активные вещества. При микроскопическом анализе подземных органов широко используются различные микрохимические реакции.

Цветки. Для микроскопического анализа цветки предварительно размачивают кипячением в воде. Затем цветок, соцветие или их части помещают на предметное стекло, заключают в каплю глицерина и закрывают покровным стеклом. Определяют тип цветка (в соцветиях сложноцветных). Диагностическое значение имеют особенности строения эпидермиса чашечки (у корзинок сложноцветных - листочков обвертки) и венчика, особенности наружного и внутреннего строения генеративных органов (пыльников, столбика, завязи). Большое внимание уделяется форме и размерам пыльцевых зерен.

Плоды. Существуют два основных типа микроскопических препаратов плодов. Для сухих плодов наиболее часто используется поперечный срез. Плоды выдерживают во влажной камере для размягчения, затем запаивают в парафиновый блок и делают тонкий поперечный срез. На микропрепарате обращают внимание на строение кожуры плода, особенности строения стенки плода (расположение и тип проводящих пучков, наличие и расположение эфирно-масличных канальцев, строение механических элементов), на форму и строение семени (семян).

Для сочных плодов чаще всего проводят микроскопический анализ порошка. Диагностическими признаками являются элементы строения эпидермиса (форма и размер клеток, наличие и тип волосков и устьиц), мякоти плода (форма и размеры клеток, кристаллические включения и включения запасных питательных веществ), элементы семян (прежде всего механические элементы).

Семена. Для микроскопического анализа семян используют препараты поперечного среза после размягчения во влажной камере и запаивания в парафиновый блок. Диагностическое значение имеют особенности строения семенной кожуры, тип семени по характеру, локализации запасающих веществ, особенности строения зародыша.

Фитохимический анализ - вид анализа, используемого для качественного и количественного определения действующих веществ с помощью химических и физико-химических методов. Эти методы отчасти описаны в общих фармакопейных статьях ГФ XI, в статьях ГФ XI на виды лекарственного растительного сырья или в других нормативных документах.

Современная нормативная документация на лекарственное растительное сырье в качестве одного из важнейших показателей обязательно включает обнаружение и нормирование содержания основных биологически активных веществ. Их определяют с помощью химических, физико-химических и биологических методов.

Предварительно анализируемую группу веществ или индивидуальное вещество извлекают из растительного сырья, для чего чаще всего используют экстракцию растворителями, в результате которой получают смесь компонентов. Затем ее очищают от примесей, делят на отдельные фракции и (или) выделяют индивидуальные вещества, используя преимущественно хроматографические методы.

Для анализа эфирных масел используют перегонку с водяным паром. Содержание эфирного масла в растительном сырье определяется способами, описанными в ГФ XI. Количество перегнанного масла измеряют с помощью специальных устройств и рассчитывают в весообъемных процентах.

К химическим можно отнести методы анализа, в основе которых лежат химические реакции. Для идентификации действующих веществ используют групповые цветные и осадительные химические реакции. К традиционным методам количественного химического анализа относятся гравиметрические и титриметрические методы.

Гравиметрический (весовой) анализ основан на выделении суммы веществ путем их осаждения из различных растворителей или за счет получения нерастворимых комплексных соединений и на последующем установлении массы взвешиванием осадка на аналитических весах. Этим методом определяют содержание полисахаридов в листьях подорожника и траве череды.

Титриметрические (объемные) методы весьма разнообразны и зависят от химических свойств исследуемых соединений. Для этих целей используются методы прямого и обратного титрования. В основу титриметрических методов могут быть положены кислотно-основные, окислительно-восстановительные реакции, реакции осаждения и образования комплексных соединений. Широко распространены методы титрования окислителями - перманганатометрия (определение дубильных веществ в сырье), йодометрия (определение арбутина в листьях толокнянки и брусники) и др. Точку эквивалентности фиксируют с помощью цветных индикаторов.

Современные физико-химические методы анализа имеют ряд преимуществ перед классическими химическими методами. Они отличаются избирательностью, высокой чувствительностью, высокой степенью автоматизации.

В тех случаях, когда качество лекарственного сырья невозможно удовлетворительно определить химическими или физикохимическими методами, используют биологический анализ. Этот метод, в частности, является определяющим при анализе лекарственного растительного сырья, содержащего кардиотонические гликозиды. Следует отметить, что биологическая стандартизация имеет ряд существенных недостатков: трудоемкость, высокая стоимость, малая точность анализа. Кроме того, биологические методы анализа зачастую не отражают истинного содержания действующих веществ в лекарственном растительном сырье.

Контрольные вопросы

1. Перечислите основные этапы заготовительного процесса лекарственного растительного сырья.

2. Перечислите основные морфологические группы лекарственного растительного сырья, применяемые в фармацевтической практике.

3. Назовите сроки сбора различных морфологических групп лекарственного растительного сырья.

4. Назовите основные правила заготовки основных морфологических групп лекарственного растительного сырья.

5. Какие правила техники безопасности необходимо соблюдать при сборе растений?

6. Какие меры необходимо соблюдать при сборе для обеспечения сохранения и воспроизводства зарослей?

7. Что такое Красная книга, и каково ее значение в охране лекарственных растений?

8. Перечислите основные виды природоохранных мероприятий.

9. Назовите виды сушки. Какие требования предъявляются к сушилкам и помещениям для сушки?

10. Охарактеризуйте режимы сушки для различных морфологических групп сырья.

11. Какие требования предъявляются к упаковке лекарственного растительного сырья?

12. Перечислите основные правила хранения лекарственного растительного сырья. Какие требования предъявляются к складским помещениям?

13. Перечислите основных вредителей сырья. Какие меры применяются для борьбы с ними?

14. Каково юридическое и организационное значение нормативных документов? Перечислите основные виды нормативных документов на сырье.

15. Каковы правила приемки лекарственного растительного сырья и отбора проб для анализа? В каких случаях сырье бракуется без анализа?

16. Назовите основные виды фармакогностического анализа. Какую цель преследует каждый из них?

ЛРС и получаемые из него продукты могут быть представлены на рынке как товар, если они по всем параметрам соответствуют НД, действующим в настоящее время в Беларуси. Чтобы определить данное соответствие, проводят фармакогностический анализ ЛРС (рис.

3), для осуществления которого необходимо:

Знать действующие НД и их новейшие изменения;

Уметь выполнять фармакогностический анализ.

Система государственного контроля осуществляет проверку качества ЛРС на соответствие требованиям НД на аптечных складах (базах), фармацевтических фабриках, предприятиях, занимающихся выращиванием ЛРС, переработкой и поставкой его или готовых ЛС на фармацевтический рынок Беларуси. При отправке ЛРС на другие аптечные склады (базы), фабрики и предприятия каждая партия сопровождается заверенной копией протокола анализа, удостоверяющей качество партии, и при поступлении на другие склады ЛРС повторному анализу не подвергается, за исключением случаев, когда возникают сомнения в его качестве.

Фармакогностический анализ - это комплекс методов анализа ЛРС, сырья животного происхождения и их продуктов, устанавливающий их подлинность и доброкачественность по всем параметрам НД.

Подлинность (идентичность) - соответствие исследуемого объекта тому наименованию, под которым оно поступило для анализа. Подлинность исследуемого ЛРС устанавливается путем следующих анализов:

Макроскопического;

Микроскопического;

Качественного химического (качественные реакции);

Люминесцентного.

Во всех случаях проводятся первый и второй виды анализа, третий и четвертый выполняются реже.

Доброкачественность - соответствие ЛРС требованиям НД. Доброкачественность ЛРС определяется исходя из его чистоты, степени измельчения (цельного ЛРС), влажности, содержания золы, действующих веществ.

Фармакогностический анализ ЛРС включает ряд последовательных анализов (рис. 3): товароведческий, макроскопический, микроскопический, фитохимический. В некоторых случаях дополнительно определяется биологическая активность ЛРС.

Товароведческому анализу подвергают все ЛРС, поступающее от различных заготовителей. Результаты анализов регистрируются в журнале. Прием ЛРС оформляется приемной квитанцией. Товароведческий анализ в большинстве случаев не требует сложного оборудования и выполняется на приемных пунктах, складах, базах. Он состоит из трех этапов:

Приемка сырья;

Отбор проб;

Испытания с помощью ряда методов.

ЛРС принимают мелкими и крупными партиями. В аптеки ЛРС поступает мелкими партиями по несколько килограммов в одной упаковке или в расфасованном виде. На склады поступают крупные партии ЛРС.

Партией считается ЛРС одного наименования массой не менее 50 кг, однородного по всем показателям и оформленного одним документом. В этом документе содержатся данные: номер и дата выдачи, наименование и адрес отправителя, наименование ЛРС; номер партии, масса, год и месяц сбора, место заготовки, результаты испытаний о качестве ЛРС, обозначение НД на ЛРС, ФИО и подпись лица, ответственного за качество ЛРС.

Единицами продукции (товара) являются кипы, ящики, мешки, баулы и т. д. Каждую единицу товара вначале подвергают внешнему осмотру для установления соответствия упаковки и маркировки НД.

Внимание обращают на состояние тары (отсутствие повреждений, подмока- ния, гнили). Так как все единицы партии товара проверить сложно, делают выборку: в партии из 1-5 единиц продукции анализируются все единицы, в партии из 6-50 единиц анализу подвергаются 5 единиц, находящихся вверху, в середине и внизу товарной партии, а в партии из более чем 50 единиц для анализа отбирается из разных мест партии 10 % единиц продукции, причем числа от 1 до 5 приравниваются к 10 единицам (например, в 51 единице товара объем анализируемой выборки будет 6 единиц). Качество ЛРС в поврежденных единицах партии проверяют отдельно от неповрежденных, вскрывая каждую единицу.

Попавшие в выборку единицы продукции вскрывают и при внешнем осмотре определяют однородность ЛРС по способу подготовки (цельное, измельченное, прессованное и т. д.), цвету, запаху, засоренности; по наличию плесени, гнили, устойчивого постороннего запаха, не исчезающего при проветривании; по засоренности ядовитыми растениями и примесями (камни, стекло, сучья, перья, помет грызунов и птиц); на глаз и с помощью 10-кратной лупы определяют наличие амбарных вредителей.

В случае если при внешнем осмотре установлено, что ЛРС неоднородно, присутствует плесень и гниль, засоренность посторонними растениями в количестве, превышающем допустимые нормы, вся партия должна быть рассортирована и вторично предъявлена к сдаче.

При обнаружении затхлого, устойчивого запаха, несвойственного данному виду ЛРС, а также ядовитых растений и посторонних примесей (стекло, помет грызунов, птиц и т. д.), зараженности амбарными вредителями II и III степеней партия бракуется, и ЛРС не подлежит приемке.

Отобранные для проверки единицы продукции соединяют в объединенную пробу, из которой методом квартования выделяют (в соответствии с нормативными требованиями ГФ РБ) среднюю и аналитические пробы. Как правило, аналитические пробы для определения подлинности сырья, измельченности и содержания примесей, его зараженности амбарными вредителями, а также на радиационный контроль и микробиологическую чистоту берутся непосредственно из объединенной пробы; все другие аналитические пробы (для определения содержания в сырье влаги, золы, действующих биологически активных веществ, присутствия пестицидов, токсинов, а иногда - генно-модифицированного сырья) берутся из средней пробы. Правила отбора и методы исследования аналитических проб излагаются в ГФ РБ, т. 1 (раздел 2.8 и др.).

Для установления степени зараженности ЛРС амбарными вредителями (см. рис. 1 и 3) соответствующую аналитическую пробу сырья помещают на сито с отверстиями диаметром 0,5 мм и просеивают. В прошедшем сквозь сито сырье установленное количество вредителей и их личинок пересчитывают на 1 кг сырья. При наличии в 1 кг ЛРС не более 20 клещей и/или 5 хлебных точильщиков, амбарной моли и ее личинок зараженность относят к I степени; при наличии более 20 свободно передвигающихся клещей и/или 6-10 хлебных точильщиков либо амбарной моли - ко II степени; при наличии более 20 клещей и/или более 10 хлебных точильщиков либо личинок амбарной моли - к III степени.

Методы определения подлинности лекарственного растительного сырья

Подлинность цельного ЛРС устанавливают в основном после макроскопического анализа; измельченного, резано-прессованного, порошкообразного и резаного ЛРС - в результате микроскопического анализа, использования люминесцентного метода и гистохимических реакций.

Макроскопический анализ ЛРС - вид фармакопейного анализа для установления подлинности и доброкачественности ЛРС - главным образом цельного, реже измельченного - по методикам ГФ РБ и другим НД. Анализ включает определение:

Формы (определяется сравнительно с простейшей геометрической);

Цвета (при дневном освещении - поверхность и на изломе);

Запаха (при растирании ЛРС между пальцами, соскабливании, растирании в ступке);

Вкуса (неядовитого ЛРС - разжевывая и выплевывая);

Размеров ЛРС (длина, ширина, диаметр: для ЛРС размером более 3 см проводят 10-15 измерений, для ЛРС размером менее 3 см - 20-30 измерений).

Микроскопический анализ - основной метод определения подлинности измельченного ЛРС: резаного, дробленого, порошкообразного, резано-прессованного в брикеты и гранулы. Данный вид анализа ЛРС основывается на знании анатомической структуры растений и заключается в том, чтобы в общей картине анатомического строения различных органов и тканей отыскать характерные диагностические признаки, которые отличают изучаемый объект от частей другого растения.

Качественный химический анализ (фитохимический анализ) используется для качественного и количественного определения действующих веществ с помощью химических, физико-химических и других методов. Фитохимические методы применяют часто для определения доброкачественности ЛРС. Для установления подлинности ЛРС используют качественные реакции и хроматографию - деление на основные действующие и сопутствующие вещества, которые изложены в НД на данный вид ЛРС.

Фитохимические реакции по идентификации ЛРС подразделяют на следующие виды:

Качественные химические реакции, для проведения которых делают водные или водно-спиртовые извлечения из исследуемого сырья. Эффект наблюдают при добавлении соответствующего реактива к полученному извлечению. Для выполнения этих реакций обычно используют пробирки, часовые или предметные стекла с лунками;

Микрохимические реакции, которые ведут одновременно с микроскопическим анализом ЛРС, наблюдая результаты невооруженным глазом и под микроскопом: такое проведение реакции значительно повышает их чувствительность.

Например, на предметное стекло помещают извлечение свежего растительного материала, содержащего алкалоиды, а рядом помещают каплю раствора пикриновой кислоты, после чего содержимое обеих капель соединяют тонким каналом, в котором наблюдают образование кристаллов пикратов алкалоидов. В качественных химических реакциях, как правило, необходим контрольный опыт;

Гистохимические реакции, с помощью которых определяют те или иные соединения непосредственно в местах локализации на срезах свежего или фиксированного материала. Результаты этих реакций наблюдают под микроскопом сначала при малом, а затем при большом увеличении. Условием проведения гистохимических реакций является их специфичность, поэтому если в исследуемом объекте присутствуют другие вещества, дающие подобные результаты реакции, их надо предварительно удалить. Наблюдать результаты реакции надо сразу после ее проведения, пока не произошла диффузия исследуемого вещества;

Хроматографические методы (в тонком слое сорбента - порошка окиси алюминия, силикагеля, агарозы или специальных сортов бумаги), позволяющие не только обнаружить, но и определить качественный состав природных соединений, имеющих диагностическое значение для идентификации ЛРС. Существуют различные методы хроматографии: твердослойная, жидкостная, газовая, газожидкостная, ионообменная, высокоэффективная и др.

Люминесцентный анализ. Его основное достоинство - высокая чувствительность и специфичность. Метод можно применять и для изучения толстых непрозрачных срезов сухого ЛРС, при исследовании извлеченных веществ (в пробирках, на хроматограмме) и непосредственно в местах их локализации в растительных тканях (люминесцентная микроскопия), т. е. одновременно можно определять отдельные группы природных соединений, способных люминесцировать (например, антраценпроизводные, флавоноиды), и анатомическую структуру ЛРС.

Биологические методы анализа ЛРС обычно применяются при изучении сердечных гликозидов.

Макро- и микроскопический анализ листьев

Макроскопический анализ листьев. После осмотра невооруженным глазом и при десятикратном увеличении даем характеристику морфологических свойств ЛРС в такой последовательности: 1) форма; 2) размеры; 3) цвет; 4) запах; 5) вкус; 6) особенности (в зависимости от вида ЛРС). Можно сравнить листья сосны, подорожника, крапивы, череды, каштана.

Определяем строение листа (простой или сложный). Обращаем внимание на строение черешка, геометрическую форму и толщину листовой пластинки, ее ку- тинизированность (кожистость). Рассматриваем листья сухими или размоченными в горячей воде (или прокипяченными в 2 % растворе натрия гидроксида - для размягчения ткани и частичного обесцвечивания хлорофилла). Сравниваем структуру верхней и нижней сторон листа, его опушенность. Цвет листовой пластинки (темно- или светло-зеленый, сизый, желтый, бурый, красноватый) устанавливаем при дневном освещении. Определяем морфологические особенности листовой пластинки (цельная, лопастная, раздельная, нитчатая, перисто-рассеченная), форму (в сравнении с простейшей геометрической фигурой), характер ее края (гладкий, зубчатый, пильчатый, выемчатый, городчатый) и жилкования (оно особенно выражено с нижней стороны листа: дуговое, линейное, сетчатое).

Уточняем структуру поверхности (гладкая, морщинистая, опушенная), характер и степень развития опушения (преимущественно по жилкам), присутствие железок, воскового налета. В конце определяем запах и вкус.

Микроскопический анализ листьев начинают с исследования эпидермиса: изучают форму эпидермальных клеток с верхней и нижней сторон листа (изодиаметрические или прозенхимные, прямоугольные, многоугольные, с извилистыми боковыми стенками, тонко- или толстостенные, с утолщениями стенок (четковидными или иными)); наличие трихомов - простых соско- и волосковидных или фигурных (одно- или многоклеточных, пучковых, звездчатых, Т-образных, головчатых, булавовидных, с розеткой клеток вокруг основания волоска или без нее); железок (простых булавовидных, одно-, двух- или четырехклеточных, грибовидных с радиальным расположением секреторных клеток, свойственным семейству Губоцветные, либо овальных, подушковидных, с ярусным расположением выделительных клеток, свойственным семейству Астровые); устьиц (число, характер расположения: эпистоматическое - на верхней стороне листа, гипоста- матическое - на нижней строне листа, амфистоматическое - на обеих сторонах листа), наличие на верхушке листа или зубчика водяных устьиц. Устанавливают тип устьичного аппарата по числу и характеру расположения вспомогательных клеток эпидермиса около замыкающих клеток устьиц:

1) у двудольных:

Диацитный устьичный аппарат: устьица окружены двумя околоустьичными клетками, смежные стенки которых перпендикулярны устьичной щели (рис. 4,1) - характерен для растений семейств Губоцветные, Гвоздичные;

Парацитный устьичный аппарат: с каждой стороны устьица вдоль его продольной оси расположены по одной или более околоустьичных клеток (рис. 4, 2) - это характерно для растений семейств Мареновые, Вересковые, Брусничные;

Анизоцитный устьичный аппарат: устьица окружены тремя околоустьич- ными клетками, из них одна значительно меньше двух других (рис. 4, 4) - такой тип устьичного аппарата обнаруживается у растений семейства Капустные;

Аномоцитный устьичный аппарат: устьица окружены неопределенным числом клеток, различающихся по форме и размерам (рис. 4, 5) - он встречается у растений семейства Лютиковые и у растений большинства других семейств;

2) у однодольных и других растений:

Тетра- и мультиперигенный (тетра- (рис. 4, 3) и энциклоцитный (рис. 4, 6)).

Механическая ткань: исследуются клетки колленхимы на периферии листовой пластинки, сосуды ксилемы и флоэмы в проводящих пучках, иногда склереи- ды среди клеток листовой паренхимы.

Проводящая ткань: исследуются сосуды (трахеиды), лубяные волокна.

Паренхима (мезофилл): изучается губчатая, столбчатая, обкладочная (сосудистых пучков злаков с С4-типом фотосинтеза), аэренхима; наличие в клетках кристаллов, включений (игольчатые, призматические, рафиды, друзы, цистолиты - грозди, песок). Рафиды встречаются у сем. Лилейные (Liliaceae), песок - у белладонны (Belladonna), цистолиты - у крапивы (Urtica), кристаллы и друзы - у горца почечуйного (Polygonum).

Запасающая ткань - главным образом паренхима: может запасать крахмал, белки, липиды. Иногда клетки паренхимы или их группы накапливают слизи, эфирные масла, смолы, стероиды, танниды. Впоследствии на их основе формируются вместилища, млечники, смоляные ходы.

Выделительная ткань может быть представлена как эктофитными структурами (например, гидатодами, различными железками на эпидермальной поверхности, подкутикулярными вместилищами эфирных масел и смол), так и эндофитными образованиями (накопительными клетками, вместилищами, секреторными каналами).

Анализ трав

Прежде всего обращают внимание на особенности строения стебля: прямой, искривленный или приподнимающийся, простой или ветвистый; характер ветвления; форму поперечного сечения (круглая, ребристая, четырехгранная, полый цилиндр); цвет поверхности, опушение, размеры (диаметр у основания, длина); расположение листьев (у основания стебля, в середине и у вершины, черешковые, сидячие, стеблеобъемлющие, с раструбами, очередное, супротивное, мутовчатое); тип соцветия (простой или сложный зонтик, кисть, колос, метелка); особенности морфологии и анатомии листьев, цветков, плодов.

В измельченном и порошкообразном сырье трав присутствуют фрагменты тканей стебля, а также цветков, листьев, плодов, семян. Микроскопический анализ трав основан на изучении микроскопии листьев, для чего отбирают небольшие их части и анализируют, как описано выше.

Анализ цветков, плодов, семян

Цветки. Устанавливают тип соцветия, опушенность его частей. Затем определяют строение околоцветника (простой чашечко- или венчиковидный либо двойной), венчика (актино- или зигоморфный, число и форму лепестков или зубчиков, их окраску), число и форму чашелистиков, число и строение тычинок, пестиков, строение завязи.

При микроскопическом исследовании обращают внимание на строение эпидермиса внутренней и наружной сторон лепестков венчика и чашелистиков, наличие, характер расположения и строение волосков, железок, механических элементов, форму и размеры пыльцевых зерен и т. д.

Плоды. Состоят из околоплодника (перикарпия) и заключенных в нем семян. Перикарпий может быть сухой (сухие плоды) или мясистый (сочные плоды). Диагностическое значение имеют форма и строение плода, его размеры (длина, ширина, поперечник), цвет, характер поверхности околоплодника, запах, вкус. Исследуют также число гнезд в плоде, наличие и число эфиромасличных канальцев, вместилищ. У сочных плодов после размачивания в горячей воде определяют строение околоплодника, количество, размер, форму, характер поверхности и цвет семян.

При микродиагностике плодов важно строение перикарпия, в котором раз- личаюттри слоя: экзо-, мезо- и эндокарпий, т. е. наружный, средний и внутренний. В экзокарпии обращают внимание на наличие и строение волосков; в мезо- карпии - на расположение и структуру механических элементов, эфиромасличных канальцев и вместилищ, кристаллических включений; в эндокарпии - на положение клеток с четковидными утолщениями стенок, волокон механической ткани, склереид.

Семена. Состоят из зародыша, эндосперма, семенной кожуры. Обращают внимание на форму, размеры, цвет, запах, вкус и общее строение семени. Диагностическое значение имеет расположение зародыша, наличие и форма рубчика. При изучении под микроскопом внимание обращают на строение семенной кожуры (слои клеток), величину и форму эндосперма, строение зародыша, на его механический слой, состоящий из вытянутых (прозенхимных) или изодиаметрических клеток с равномерно утолщенными стенками, а также на пигментный слой.

Анализ кор

Особое внимание обращается на толщину коры, окраску и особенности строения наружной и внутренней поверхностей. Наружная поверхность коры обычно серого или коричневого цвета, гладкая или морщинистая, с характерными чечевичками и пятнами; внутренняя поверхность, как правило, светлее, гладкая или гофрированная; поверхность поперечного излома зернистая или занозисто-волокнистая из-за наличия механических элементов.

Перед получением поперечных срезов кору в течение 1-2 суток размачивают в смеси глицерина, спирта и воды (1:1:1). Поскольку кора ветвей и корневищ включает периферические слои клеток до камбия, в ней отсутствуют сосуды ксилемы (имеются лишь волокна луба, часто в тесной связи с кристаллоносными клетками).

При микроскопическом анализе обращают внимание на строение пробки, ее цвет, характер колленхимы, толщину первичной и вторичной коры, наличие феллодермы и особенности каменистых клеток, лубяных волокон, их скоплений или тяжей, а также кристаллов оксалата кальция, клеток с эфирными маслами, смолами, вместилищ и ходов, млечников (рис. 5). align=center>

Рис. 5. Кора (схематическое изображение):

1 - ядра; 2 - эпидерма; 3 - пробка (феллема); 4 - феллоген; 5 - феллодерма; 6 - друзы; 7 - каменистые клетки

У всех подземных органов определяют форму, особенности наружной поверхности (край может быть ровный или морщинистый, с продольным или поперечным рисунком складок, с рубцами от прикорневых листьев или буграми и точками - следами отмерших стеблей и корней) и излома (ровный, зернистый, волокнистый, занозистый, короткощетинистый и др.), цвет на поверхности и наиз- ломе, размеры, запах, вкус.

Корни по морфологическим признакам классифицируют на конические, стержневые и мочковатые, тонкие и толстые, длинные и короткие. Корни могут иметь первичное или вторичное анатомическое строение (рис. 6, А, Б). При первичном строении в центре виден осевой цилиндр, в котором прежде всего обращает на себя внимание 2-, 3-, 4-, 5- или многолучевая структура, образованная сосудами ксилемы. Первичная анатомическая структура корней у однодольных сохраняется до конца жизни, а у двудольных сменяется вторичной структурой, когда радиальное расположение проводящих тканей становится не столь отчетливым и сменяется коллатеральным, при котором основное пространство в центре составляет древесина. Покрывающие снаружи центральный цилиндр слои ризодермы, первичной коры и эндодермы слущиваются и в результате активности перицикла заменяются вторичной корой, содержащей наружный слой пробки, очень тонкий слой феллогена, феллодерму, в которой могут встречаться каменистые клетки, волокна луба, друзы, а у некоторых видов - также секреторные вместилища и каналы.

Корневища - простые и разветвленные, толстые и тонкие (рис. 6, В, Г, Д). У однодольных растений корневища имеют только пучковое строение: пучки (закрытого типа, без камбия - его активность рано заканчивается) беспорядочно

Клубни имеют стеблевое происхождение, формируются на концах подземных побегов (столонов), на их поперечном срезе видно пучковое строение. Поверхность клубня обычно морщинистая, ямчатая, бугристая.

Луковицы состоят из утолщенных сочных чешуй, расположенных на укороченном стебле (донце), и нескольких сухих, покрывающих ее снаружи. Строение луковиц обычно рассматривают на продольном разрезе.

Приемщиками, закупщиками растительного лекарственно-технического сырья являются:

1. Министерство здравоохранения РФ, которое закупает сырье в специализированных сельскохозяйственных предприятиях.

2. Аптекоуправления, которые через районные и сельские аптеки закупают сырье для удовлетворения собственных потребностей.

3. Различные организации, предприниматели, которые закупают сырье у сборщиков и поставляют потребителям.

Приемные пункты, предприниматели и аптеки закупают сырье непосредственно от сборщиков. Оно при приемке подлежит 100%-му осмотру. Для этого доставленное сырье рассыпают тонким слоем на чистый брезент или полотную бумагу и подвергают товароведческому анализу в хорошо освещенном месте.

Товароведческий анализ проводят для определения подлинности, чистоты и доброкачественности сырья. В зависимости от агрегатного состояния (цельное, изрезанное, порошкообразное) и целевого назначения лекарственное сырье исследуют (анализируют) макроскопическим, микроскопическим, фитохимическим, биологическим, хроматографическим, люминесцентно-микроскопическим и другими методами.

Подлинностью (идентичностью) называют соответствие исследуемого образца сырья наименованию, под которым он поступил для анализа. Устанавливают ее макро- и микроскопическим методами.

Чистота лекарственного сырья определяется отсутствием недопустимых и наличием допустимых примесей в пределах установленных норм. Определяют ее товароведческим анализом.

Доброкачественность сырья зависит от многих факторов. Прежде всего она определяется правильностью и своевременностью сбора, сушки, отсутствием плесени и вредителей, нормальной влажностью, зольностью и содержанием биологически активных веществ, которые определяют товароведческим анализом. Для выявления отдельных показателей качества (отсутствия вредителей, допустимого процента измельченности и др.) применяют специальные методы исследования. Без данных товароведческого анализа сырье не может быть признано качественным и использовано по назначению.

Полный товароведческий анализ сырья очень сложный и в аптеках не проводится. Его осуществляют в межрайонных конторах и центральных районных аптеках, на базах и складах при первичной приемке больших партий сырья, по истечении сроков хранения, при подозрении на потерю должного качества в случае подмоченности, засорения, увлажнения, повышенной измельченности.

В соответствии с действующими НТД товароведческий анализ лекарственно-технического сырья проводят в три этапа: 1 – приемка сырья, 2 – отбор проб и 3 – анализ выделенных проб.

Приемку лекарственно-технического растительного сырья начинают со знакомства с сопроводительными документами и с внешнего осмотра всей поступившей партии сырья.

В аптеке сырье поступает мелкими партиями по нескольку килограммов в одной упаковке. На склады и базы поступают крупные партии сырья массой не менее 50 кг, состоящие из кип, мешков, ящиков и других упаковок.

При внешнем осмотре партии сырья обращают внимание на правильность маркировки, сохранность (целостность) тары, отсутствие подмочки, подтеков, поломок, пробоев и других повреждений, влияющих на качество и сохранность сырья. Единицы продукции с поврежденной тарой отделяют и качество сырья в них проверяют отдельно.

Для проверки качества сырья из партии с неповрежденными единицами упаковки продукции делают выборку. Единицы упаковки продукции отбирают из различных мест партии. Объем выборки зависит от величины партии. Так, если в партии продукции от 1 до 5 единиц упаковки, то в выборку включают все единицы, от 6 до 50 единиц упаковки – 5 единиц, более 50 единиц упаковки – 10% единиц продукции от всей партии.

Если при внешнем осмотре обнаружено неоднородное сырье, частично тронутое плесенью и гнилью, то вся партия должна быть рассортирована и только после этого вторично предъявлена к сдаче. Для этого вновь делают выборку и результаты проверки становятся окончательными.

Если при вскрытии отобранных для проверки качества единиц продукции обнаружены устойчивый затхлый запах, не исчезающий при длительном проветривании; посторонний запах, не свойственный данному виду сырья; отсутствие запаха, характерного для данного вида сырья; ядовитые растения; загрязненность сырья (стекло, камни, помет грызунов, птиц и др.); загрязненность амбарными вредителями II и III степени, то такая партия сырья приемке не подлежит.

Попавшие в выборку единицы упаковки продукции вскрывают и путем внешнего осмотра определяют однородность сырья по цвету, запаху и засоренности; наличие плесени, гнили; устойчивого постороннего запаха, не исчезающего при проветривании; присутствие ядовитых растений, посторонних примесей (камни, стекло и др.) и амбарных вредителей (с помощью лупы с увеличением в 5-10 крат).

От каждой единицы упаковки продукции, попавшей в выборку, отбирают по 3 точечные пробы: сверху, снизу и из середины. Из крупных единиц упаковки продукции (кипы, тюки) пробы берут на глубине 10 см. Пробы семян и сухих плодов извлекают зерновым щупом. Из ящиков первую точечную пробу отбирают с поверхности, вторую – после удаления сырья примерно до половины ящика, а третью со дна ящика. Пробы извлекают осторожно, чтобы не увеличить измельченность. Смесь всех точечных проб, отобранных из анализируемых тарных мест, образует объединенную пробу, из которой методом квартования находят среднюю пробу.

Средняя проба – часть объединенной пробы, отбираемая для проведения полого товароведческого анализа, т.е. по всем показателям. Масса средней пробы для каждого вида сырья указана в соответствующем стандарте и составляет для сочных плодов 200 г, сухих плодов – 300 г, листьев – 400 г, трав и подземных органов растений – 600 г и т.д.

Для формирования средней пробы сырье на столе разравнивают в виде квадрата с толщиной слоя не менее 3 см и по диагонали делят на четыре треугольника. Из двух противоположных треугольников сырье удаляют. Из двух оставшихся треугольников сырье вновь разравнивают в виде квадрата, делят по диагонали на четыре треугольника и удаляют сырье из двух противоположных треугольников. Такие операции продолжаются до тех пор, пока количество сырья, оставшегося в двух треугольниках, не станет соответствовать массе средней пробы, приведенной в стандарте. Отклонения в массе средней пробы не должны превышать ±10%.

Среднюю пробу сырья упаковывают в полиэтиленовый мешок (если сырье не содержит эфирное масло) или в многослойный бумажный пакет и прикрепляют этикетку с указанием поставщика сырья, массы и даты поступления партии. Из средней пробы методом квартования выделяют три аналитические пробы для определения измельченности и содержания примесей, влажности, содержания золы и действующих веществ.

Аналитической пробой называют часть средней пробы, выделенной для проведения конкретного анализа. После выделения пробы для определения измельченности и содержания примесей оставшуюся часть средней пробы крупных видов сырья (трава, корни, корневища и им подобные) режут ножницами или секатором на крупные куски, тщательно перемешивают и выделяют аналитические пробы для определения влажности, содержания золы и действующих веществ. Масса аналитических проб должна соответствовать нормам, предусмотренным в нормативно-технических документах. Аналитическую пробу, предназначенную для определения влажности сырья, немедленно помещают в герметически закрывающуюся банку.

Исследования лекарственно-технического растительного сырья проводят в соответствии с требованиями действующих НТД. В зависимости от агрегатного состояния сырья (цельное или измельченное) его начинают с макроскопического или микроскопического анализа, а иногда – с определения измельченности сырья.

Макроскопическим анализом устанавливают подлинность цельного сырья по морфологическим признакам: внешнему виду, цвету, размерам, запаху и вкусу. Для исследования сырье раскладывают на доске (клеенке) внимательно осматривают и сравнивают с эталонными образцами.

Внешний вид сырья исследуют невооруженным глазом или под лупой с увеличением 10 раз (определяют тип и форму сырья, строение поверхности). Он должен соответствовать ботаническому описанию растения с теми изменениями, которые возникают при сушке. Размеры сырья измеряют миллиметровой линейкой. Делают несколько измерений и по ним устанавливают среднюю величину объекта. Мелкие плоды и семена измеряют миллиметровой бумагой, раскладывая их рядами в одну линию. Размер шаровидных семян и плодов определяют путем просеивания через сита с круглыми отверстиями, предусмотренными НТД.

Цвет семян определяют при дневном рассеянном освещении. Цвет высушенного сырья может полностью соответствовать свежему (не высушенному) сырью, например, цвет корней, корневищ, почек, коры, цветов бессмертника, травы сушеницы болотной. Чаще всего цвет сырья в процессе сушки в большей или меньшей степени изменяется, но при правильной сушке эти изменения незначительны. Так, травы и листья должны оставаться зелеными с темными или светлыми оттенками или приобрести сероватый оттенок. Окрас цветов может стать несколько более блеклым. Белые цветы приобретают желтые или сероватые оттенки. Незначительно изменяется при сушке цвет ягод малины, шиповника и других.

Запах сырья при правильной сушке сохраняется, а в некоторых случаях усиливается. У отдельных видов сырья нет запаха или он очень слабый. Это следует учитывать при определении подлинности продукта. Запах в сухих растениях определяют путем растирания их между пальцами. Твердое сырье (кора, корни и т.п.) нужно поскоблить ножом или измельчить в ступке. Отдельные растения лучше выделяют запах при смачивании водой. Запах должен быть свойственный растению данного вида, не затхлый, не кислый, не прогорклый.

Вкус служит дополнительным признаком для отдельных видов сырья. В большинстве случаев это малопоказательный признак, но для ягод вкус является показателем вида и качества сырья. Лекарственное сырье следует пробовать с осторожностью, мелкими кусочками и, пожевав, не проглатывать, а тотчас выплюнуть, так как может оказаться ядовитым. Ядовитое сырье пробовать нельзя. Вкус листьев, трав, цветков лучше определять в 10%-ном отваре.

Макроскопический анализ проводят всегда при приемке сырья на базах, складах, в аптеках и других пунктах. В зависимости от морфологической группы сырья при исследовании особое внимание обращают на различные признаки.

Кора – наружная часть стволов, ветвей и корней деревьев, кустарников, расположенная к периферии от камбия. Подлинность ее не всегда можно определить по внешнему виду, поэтому для идентификации необходимо микроскопическое исследование. При макроскопическом исследовании определяют толщину и форму кусков, особенности наружной и внутренней поверхности коры (наличие чечевичек, бороздок) и характер излома (неровный, занозистый, щетинистый или зернистый). Цвет коры определяют с двух сторон, вкус – на сухом сырье. Запах коры усиливается при увлажнении или соскабливании внутренней поверхности. При соскабливании наружной поверхности у некоторых видов сырья обнажается слой другого цвета. Кора корней лишена чечевичек и лишайников.

Цветы используют в неизмельченном виде, поэтому для определения подлинности сырья достаточно исследовать внешние признаки. При необходимости сырье рассматривают под микроскопом. Цвет, запах и размеры цветов устанавливают на сухом сырье. Для определения строения цветка его размачивают в горячей воде, помещают на стекло, расчленяют двумя иглами под лупой и рассматривают чашечку, венчик, тычинки, пестик.

Листья целые или их части (отдельные листочки сложного листа) при сушке сморщиваются, поэтому для анализа их предварительно размачивают, погрузив на несколько минут в горячую воду, затем на стекле или светлой клеенке расправляют при помощи пинцета и иглы, чтобы были видны форма листа, край, жилкование, черешок. Мелкие и кожистые листья не размачивают. Рассматривают поверхность листа с обеих сторон и выясняют, она голая или опушенная, жилки вдавлены или вступают, характер жилкования, наличие железок. Наличие эфирномасличных железок и других образований на поверхности листа, а также вместилищ в мезофилле определяют с помощью лупы с 10-кратным увеличением.

Травы – надземные части травянистых растений – состоят из листоносных и цветоносных стеблей. В них присутствуют цветки, иногда и плоды разной степени развития. Для установления подлинности в сухих травах определяют длину стебля, диаметр цветка или соцветия, опушенность, цвет, запах; в размоченных травах – форму листа, характер листорасположения, форму стебля, тип соцветия, строение цветка и тип плода. Форму стебля рассматривают на поперечном разрезе. Листья, цветки и плоды обрывают и исследуют отдельно.

Семена цельные, отдельные семядоли легко распознать по внешнему виду невооруженным глазом или под лупой с 10-кратным увеличением. Трудно определяемые семена исследуют под микроскопом. Для установления подлинности семян определяют их форму, поверхность, которая может быть гладкой, бугорчатой или ячеистой, голой или опушенной. В необходимых случаях в семенах рассматривают зародыши, кожуру, запасные питательные вещества. Диагностическое значение иногда имеют рубчик и семяшов. Цвет и запах семян устанавливают при соскабливании или растирании. Размеры мелких семян определяют путем раскладывания их в ряд на миллиметровой бумаге, а шарообразных – путем просеивания через сито с круглыми отверстиями, установленными НТД.

Плоды истинные и ложные, соплодия, сборные (сложные) плоды и их части исследуют невооруженным глазом или под лупой (х10). Определяют форму плодов и характер поверхности кожуры. Размер мелких плодов определяют так же, как и семян. Сочные плоды вначале рассматривают в сухом виде, а затем кипятят или размачивают в горячей воде и определяют форму и особенности строения околоплодника. Затем отделяют семена от мякоти, обмывают и устанавливают их форму, а также подсчитывают число семян в плоде. Иногда плод разрезают поперек и считают количество гнезд и семян в каждом гнезде.

Подлинность целых корней, корневищ и клубней устанавливают по внешним признакам невооруженным глазом или под лупой с 10-кратным увеличением. Измельченное сырье исследуют под микроскопом. Выясняют тип подземного органа, его форму, размеры, способ обработки, цвет наружной поверхности и на изломе. На неочищенной поверхности обращают внимание на продольные и поперечные морщинки, остатки и следы листьев. Выявляют характер поверхности на свежем изломе (ровный, волокнистый или другой).

Микроскопический анализ основан на определении признаков анатомического строения и чаще применяется для исследования резанного и порошкообразного сырья. Для исследования образец (пробу) анализируемого объекта помещают на предметное стекло в капле жидкости, накрывают покровным стеклом и рассматривают сначала при малом увеличении микроскопа для общей ориентировки, а для детального анализа – при большом увеличении.

Жидкости, применяемые для изготовления микропрепарата, называют включающими и делят их на индифферентные и просветляющие. Индифферентные жидкости – это вода, глицерин, масло. Они не реагируют с исследуемым сырьем, служат средой для его рассмотрения. Вода применяется для ориентировочного исследования. Она не изменяет форму и окраску клеток. В воде хорошо просматриваются крахмальные зерна и включения оксалата кальция, но в ней растворяется слизь и распадаются алейроновые зерна, а жирное масло собирается в более крупные капли. В глицерине препараты не высыхают и могут сохраняться несколько дней, а при продолжительном воздействии ткани становятся прозрачнее, поэтому глицерин относят к слабо-просветляющим жидкостям. Масло применяют для исследования веществ, растворимых в воде.

Просветляющие жидкости применяют для того, чтобы сделать препарат более прозрачным. Лучшей просветляющей жидкостью считают раствор хлоралгидрата. При воздействии хлоралгидрата воздух из препарата вытесняется, крахмальные зерна разбухают и расплываются; жирные и эфирные масла растворяются; белковые вещества, хлорофилл, смолы и другие включения разрушаются; темноокрашенные оболочки светлеют; без изменения остаются включения оксалата кальция. Для ускорения действия хлоралгидрата (он действует медленно) рекомендуют препарат осторожно подогреть, но не кипятить.

Действие растворов КОН и NаОН в концентрациях от 5 до 15% сходно с действием хлоралгидрата: крахмальные зерна разбухают и быстрее превращаются в клейстер, жиры при нагревании омыляются.

Жидкости, вступающие в химические реакции, помогают установить присутствие определенных веществ в рассматриваемом объекте.

Реактив на крахмал (раствор Люголя) дает сине-фиолетовое окрашивание с крахмалом, которое при хранении выцветает и слабо окрашивает.

Реактив на жирные и эфирные масла (судан III) при легком нагревании капли масел окрашиваются в желто-красный цвет; так же, но несколько медленнее, окрашиваются смолы, кутикула, млечные сосуды и пробка.

Реактивов на слизь несколько:

1. Смесь черной туши (1 часть) и воды (9 частей). Готовят ее по мере надобности. Исследуемый порошок размещают в 1-2 каплях этой туши. На темно-сером поле зрения между неясно различимыми частичками порошка белыми островками выделяются стекловидные бесструктурные комки слизи. Они постепенно набухают и растекаются, растворяясь в воде. Пузырьки воздуха могут дать похожую картину, однако они окружены резким черным контуром, в то время как комки слизи матовые и края их расплывчаты.

2. Метиленовый синий – окрашивает слизь в голубой цвет.

3. Раствор КОН – окрашивает слизь в желтый цвет.

Реактивы на клетчатку:

1. Хлорцинкйод – окрашивает клетчатку в фиолетовый цвет.

2. Аммиачный раствор окиси меди. Клетчатка в этом растворе медленно набухает и растворяется. Кутикула остается нерастворенной.

Реактивы на одревесневшие клетки:

1. Флороглюцин с хлористоводородной кислотой – окрашивает одревесневшие клетки в красный цвет. Реакцию проводят на часовом стекле: срез смачивают 1%-ным спиртовым раствором флороглюцина, а через несколько минут, когда срез пропитается, прибавляют крепкую дымящую хлористоводородную кислоту. Покраснение видно невооруженным глазом.

2. Анилина сульфата раствор – окрашивает одревесневшие ткани в зеленовато-желтый цвет.

Реактив на инулин. Соскоб сухого корня или порошок из него смачивают 20%-ным спиртовым раствором α-нафтола и концентрированной серной кислотой, и он окрашивается в фиолетово-розовый цвет. При замене α-нафтола резорцином проба приобретает красный цвет, а при замене – тимолом – розово-малиновый.

Зараженность сырья вредителями (рис. 35) определяют трижды:

1) – при внешнем осмотре в единице продукции, попавшей в выборку;

2) – при определении измельченности сырья в результате его просева;

3) – при определении примесей – после отсева измельченных частей.

Степень зараженности сырья вредителями устанавливают по количеству насекомых в 1 кг выборки. Для клещей установлены такие нормативы: I степень зараженности – в 1 кг сырья не более 20 насекомых; II степень – более 20 клещей, свободно передвигающихся по поверхности сырья и не образующих сплошных масс; III степень – много клещей, образующих сплошные массы и движение их затруднено.

Для амбарной моли и хлебного точильщика при I степени зараженности в 1 кг сырья должно быть не более 5 вредителей, при II степени – от 6 до 10 вредителей, при III степени – более 10 вредителей.

Рисунок 35 – Амбарные вредители лекарственного растительного сырья:

А – амбарный долгоносик и его личинка; Б – хлебный точильщик и его личинка;

В – хлебная, или амбарная, моль и ее личинка; Г – мучной клещ

При первой степени поражения, после удаления вредителей, сырье допускают для продажи в аптеках. При второй степени зараженности сырье можно использовать только для приготовления препаратов. При третьей степени поражения вредителями сырье используют на заводах для извлечения чистых биологически активных веществ или его сжигают, если на заводе не используют.

Измельченность сырья определяют путем просева пробы через сито с отверстиями, указанными в НТД на данный вид продукции. Пробу помещают в сито и просеивают вращательными движениями. Если проба не помещается на сите, то ее просеивают порциями. Все измельченное сырье взвешивают и вычисляют процентное соотношение его к массе аналитической пробы.

Содержание примесей устанавливают после отсева измельченного сырья и определяют вредителей. Содержимое сита высыпают на доску или клеенку и отбирают все примеси, не соответствующие наименованию рассматриваемого вида сырья и взвешивают каждый вид примесей отдельно с погрешностью не более 0,1 г. Затем содержание каждого вида примеси в процентах (x ) вычисляют по формуле:

x = (m 1 · 100) / m 2 ,

где m 1 – масса примеси (г); m 2 – масса аналитической пробы (г).

Стандарты допускают определенный процент примесей для каждого вида сырья как органические (части того же растения или примеси других растений: сено, солома, прутья), так и минеральные (пыль, песок, земля, камешки, стекло).

Примеси подразделяют на допустимые и недопустимые. К недопустимым примесям относят ядовитые растения металлические предметы, стекло, помет грызунов и птиц. Не допускаются примеси другого вида сырья, т.к. они могут обладать противоположными действиями. Например, к плодам жостера слабительного не допускается примесь плодов черемухи, оказывающих вяжущее действие и наоборот. К траве термопсиса недопустима примесь плодов термопсиса, так как химический состав и применение их неодинаковы (Кузнецова, 1987).

Влажность сырья устанавливают путем высушивания аналитической пробы до абсолютно сухого состояния (после испарения гигроскопической влаги и летучих веществ). Влажность сырья (х , %) вычисляют по формуле:

x = (m – m 1) · 100) / m ,

где m – масса сырья до высушивания, г; m 1 – масса сырья после высушивания, г.

Содержание золы в растительном сырье определяют по массе несгораемых веществ, оставшихся после сжигания и прокаливания сырья. Золу подразделяют на общую, слагающуюся из минеральных примесей (земля, песок, камешки, пыль), и золу, не растворимую в 10%-ной HCl (хлористоводородной кислоте), представляющую собой остаток после обработки общей золы хлористоводородной кислотой и состоящую главным образом из кремнезема.

x 1 = m 1 · 100 ·100 / m2 · (100 – W) ,

где m 1 – масса золы, г; m 2 – масса сырья, г; W – потеря в массе при высушивании, %.

x 2 = (m 1 – m) ·100 · 100) / m 2 · (100 – W) ,

где m 1 – масса золы, г; m – масса золы фильтра, г; m 2 – масса сырья, г; W – потеря в массе при высушивании, % (Кузнецова, 1987).

Для определения содержания биологически активных веществ проводят еще фитохимический, биологический, люминесцентный и хроматографический анализы в соответствии с требованиями специальных НТД. Выполняют подобные анализы в лабораториях крупных пунктов концентрации сырья.

В процессе определения качества сырья обращают внимание на наличие тех или иных пороков (отклонения от нормы). В зависимости от причин происхождения их можно объединить в группы пороков, возникающих в период роста растения, зависящие от сроков и времени сбора сырья, связанные с несоблюдением правил сбора, образующиеся при первичной обработке и сушке сырья, связанные с нарушением условий хранения и транспортирования товара.

Растительное лекарственно-технической сырье относят в брак, если в нем обнаружены:

Устойчивый затхлый запах, не исчезающий при проветривании;

Посторонний запах, не свойственный данному виду сырья;

Отсутствие запаха, свойственного данному виду сырья;

Наличие плесени и гнили;

Примесь посторонних ядовитых растений;

Примесь посторонних неядовитых растений, наличие которых затрудняет или делает невозможным использование сырья по назначению;

Загрязненность сырья посторонними предметами (камни, железо, бумага, стекло и прочие), которые нельзя отнести к числу нормальных органических примесей;

Поврежденность грызунами и наличие помета грызунов и птиц;

Зараженность сырья амбарными вредителями.